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CO2培養(yǎng)箱是模擬細(xì)胞、組織、微生物生長環(huán)境的設(shè)備。
在培養(yǎng)過程中,除了溫度、CO2濃度、濕度等各項(xiàng)指標(biāo)精確穩(wěn)定控制外,消毒、滅菌同樣是保證培養(yǎng)效果的重要方式。
消毒,指殺死病原微生物,但不一定能殺死細(xì)菌芽抱的方法,通常是采用化學(xué)的方法來達(dá)到消毒的作用。
滅菌,指把物體上所有的微生物、細(xì)菌芽孢、孢子全部殺死的方法,通常用物理方法來達(dá)到滅菌的目的。
消毒和滅菌雖然存在差異,但都是培養(yǎng)過程中消除污染的有效手段。
不同的殺菌、滅菌方法在殺菌原理、殺菌效果、操作的便捷性方面有各自的特點(diǎn)。
化學(xué)方法
一般的化學(xué)方法是通過化學(xué)試劑擦拭的方式,對(duì)物體表面進(jìn)行快速的消毒,常見用戶培養(yǎng)箱的化學(xué)消毒劑有75%酒精和雙氧水或者硫酸銅溶液?;瘜W(xué)方法屬于表層殺菌,效率高,時(shí)間短,操作便捷,但消毒不完全,殺菌限制比較大,化學(xué)試劑不能直接接觸到的部位就失去了殺菌的效果,通常作為去除污染的重要輔助手段。
物理方法
物理方法有過濾方法和紫外殺菌方法,通過箱體內(nèi)安裝HEPA過濾器和微生物過濾器,對(duì)箱體內(nèi)氣體實(shí)現(xiàn)循環(huán)凈化,保證箱體內(nèi)潔凈等級(jí),有效過濾箱體內(nèi)懸浮的細(xì)菌等生物污染物。物理過濾能夠?qū)崟r(shí)運(yùn)行,提供一個(gè)相對(duì)安全無菌的培養(yǎng)環(huán)境。但過濾器本身不能起到滅菌的效果,需要定期進(jìn)行更換,另外如果培養(yǎng)箱受到了污染就須啟動(dòng)熱力學(xué)的滅菌方法,達(dá)到完全滅菌的目的。紫外殺菌利用紫外線的輻射實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物的消毒,是一種能夠快速消毒的方法,但殺菌效果受紫外燈功率大小、箱體結(jié)構(gòu)及箱內(nèi)濕度的影響較大,存在死角,紫外線照射不到的地方如風(fēng)道部位就沒法達(dá)到消毒的目的,是一種并不完全的消毒方式。
熱力學(xué)方法
屬于真正的滅菌方法,利用高溫環(huán)境使微生物DNA、RNA變性,失去活性,能夠?qū)ρ挎摺㈡咦宇悓?shí)現(xiàn)殺滅,達(dá)到完全滅菌的目的。常見的熱力學(xué)滅菌溫度有90℃高溫高濕環(huán)境以及120℃以上的高溫干熱條件,溫度越高,滅菌的時(shí)間越短,但整個(gè)熱力學(xué)滅菌過程時(shí)間長,一般在12小時(shí)以上,甚至達(dá)到24小時(shí)。熱力學(xué)滅菌培養(yǎng)過程完全停止才能進(jìn)行,對(duì)于一些長期培養(yǎng)的培養(yǎng)箱幾乎常年在使用,沒法進(jìn)行有效的高溫消毒。熱力學(xué)消毒往往在很長時(shí)間使用后,或者箱體內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)明顯污染的情況下才會(huì)采用的方法,所以要真正保證培養(yǎng)箱使用安全,需要遵照廠家指導(dǎo)意見對(duì)具有熱力學(xué)滅菌方法的培養(yǎng)箱定期進(jìn)行完全滅菌,保證培養(yǎng)的生物安全性。